Laboratorium Biologi Fakultas Kedokteran Universitas Islam Sultan Agung 2014 CARA KERJA ISOLASI DNA Bahan baku pisang Potong pisang 12 buah menjadi kecilkecil Taruh pada blender serta campur dengan air sekitar 100 ml ID: 726041
Download Presentation The PPT/PDF document "Petunjuk Materi Isolasi DNA" is the property of its rightful owner. Permission is granted to download and print the materials on this web site for personal, non-commercial use only, and to display it on your personal computer provided you do not modify the materials and that you retain all copyright notices contained in the materials. By downloading content from our website, you accept the terms of this agreement.
Slide1
Petunjuk Materi Isolasi DNA
Laboratorium Biologi
Fakultas Kedokteran
Universitas Islam Sultan Agung
2014Slide2
CARA KERJA ISOLASI DNA
Bahan baku pisang
Potong pisang 1-2 buah menjadi kecil-kecil
Taruh pada blender serta campur dengan air sekitar 100 ml
Tambahkan NaCl 1 ml dan Blender sampai halus
Taruh hasil tersebut pada tabung conicel sampai 5 ccSlide3
5. Beri Larutan Lisis Buffer sekitar 750 mikro liter
6. Kocok dengan perlahan sekitar 1-3 menit
7. Diamkan sekitar 5-10 menit
8. Tambahkan 1 ml Proteinase K
9. Gojok perlahan-lahan sekitar 1-3 menit
10. Tambahkan etanol dingin 1/3
11. Amati hasil
12. Lakukan pembacaan pada spektofotometriSlide4
CARA KERJA ISOLASI DNA
Bahan Baku buccal
Lakukan seperti Massage pada buccal
Kumurr dengan menggunakan air selama minimal 3 menit
Lalu tampung hasil air kumuran pada tabung conicel besar
Tambah NaCl 1 mL. Tambah
Buffer lisis (3cc)
Perbandingan 20 :3
5. Kocok secara perlahan selama 1-3 menitSlide5
6. Tunggu selama 5-10 menit
7. Tambah Proteinase 1 ml
8. Kocok secara perlahan selama 1-3 menit
9. Tambahkan etanol dingin 1/3 nya
10. Amati hasil
11. Lakukan pembacaan pada spektofotometriSlide6
Panjang gelombang untuk membaca DNA adalah 260 nanometer
Panjang gelombang untuk membaca protein adalah 280 nanometer
260/280 rasio ketentuan 1,8 (N)
>
1,8 kontaminan RNA
< 1,8 kontaminan proteinSlide7
Bahan untuk isolasi DNA berasal dari :
Tumbuhan
Hewan contoh pada buccal
Bakteri
Pada tumbuhan yang banyak mengandung DNA:
Bayam
Kacang polong
Pisang
Brokoli
Strawberry Slide8
Dinding sel (di pecah)
membran (lisis) inti sel DNA dan protein histon protein histon akan di pecah oleh enzim proteinase K
DNA akan di presipitasi oleh etanol dingin agar presible seperti benang
Untuk memecah dinding sel bisa di lakukan
Di blender
Di tumbuk
Di simpan dengan suhu minus 70Slide9
Perbedaan isolasi DNA pada hewan dan tumbuhan adalah
Pada tumbuhan terdapat dinding sel jadi hari di pecah terlebih dahulu
Sedangkan pada hewan tidak ada dinding sel maka langsung di beri buffer lisis